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      生物病理切片
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      病理切片的制作

      2021-05-31 08:35:50

      病理切片的制作

      取一定大小的病变组织,用病理组织学方法制作病理切片(通常将病变组织埋入石蜡块中,用切片机切片,用苏木精-伊红(H-E)染色),用显微镜进一步检查病变。病变的发展过程,进行病理诊断。

      动物病理标本

      切片和贴片。

      修整蜡块:

      1.根据其组织的大小,在组织边缘约0.1~0.2cm处,将剩余块切掉,否则容易引起组织皱缩。

      2.准备切片工具:切片刀、毛笔、眼科镊子(弯曲)、漂流温度调节器。

      3.安装蜡块:将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上。

      4.安装切片刀:将切片刀安装在切片机的刀台上,拧紧刀台上的紧固螺钉,使切片不振动,保持一定的切片厚度。

      5.切片厚度:切片机厚度调节器刻有0~50μm或0~25μm,可任意选择厚度,石蜡切片厚度一般为4~6μm。

      6.切片。

      7.铺装:用眼科镊子将蜡带轻轻铺在40~45℃的水面上,借用水的张力和水的温度,自然平整略皱的蜡带。

      8.贴片:待切片在恒温水面上充分展平后,将蜡片捞到载玻片中段,倾斜载玻片上的余水,放入60~65℃恒温箱内或切片漂烘温度控制器烘箱内15~30分钟,去除溶解组织间隙的石蜡。

      染色和密封。

      常用的染色方法是苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin)染色,简称H.E染色。该方法可用于固定液固定组织和各种埋入法的切片。苏木素是一种碱性染料,可以将组织中的嗜碱性物质染成蓝色,如细胞核中的染色质;伊红是一种酸性染料,可以将组织中的嗜酸性物质染成红色。例如,大多数细胞的胞质和核仁在H.E染色切片中都是红色的。

      H.E染色程序如下,脱苯,复水,染色,脱水,透明,密封。

      传统苏木素染色中的对比染色为伊红,近年来一些实验室中使用了焰红(phloxine),另外还使用了桔黄G(OrangeG)、比布里希猩红(Biebrichscarlet)、波尔多红(Bordeauxred)等。伊红是一种常用的染料,如染胞质,胶原纤维,肌纤维,嗜酸性颗粒等。

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