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      生物病理切片
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      组织学切片的制作过程是什么?

      2021-05-17 09:15:07

      组织学切片的制作过程是什么?

      组织学切片的制作过程实际上很麻烦,所需的步骤非常多,而且每个制作过程都要细致,不能出错。组织学切片的制作过程是什么?相信很多人都不知道。为了帮助大家,下面为您简要介绍。

      组织切片

      1、将未受损伤的组织切割成小样本。

      2、将标本放在卡片的一端。然后标记卡片,将带标本的一端浸入液氮中。等待60s后,取出标本,放在干冰上。修剪卡片,使其大小比组织块稍大,转入有预冷(-70℃)标记的小瓶中。

      3、切片前,用1%的明胶包装清洁的玻璃。加热到50℃,明胶溶于水中,冷却,加入0.02%的氮钠。将玻璃片浸入明胶溶液中30s,取出,自然干燥。

      4、根据仪器使用说明书,用低温恒温器制作冷冻切片。通常切片厚度在5-10gm之间。用包过的载玻片收集切片。

      5、让切片自然干燥。浸入新鲜配制的4%多聚甲醛中2min。

      6、用PBS洗几次,放入含有1%NP-40的PBS中的5rain。

      7、将带组织切片的载玻璃放入湿盒中。加上适当稀释度的抵抗,使用含蛋白质的溶液,如3%BSA/PBS稀释抗体。

      8、将玻璃片放入湿盒,在室温下至少孵化60分钟。对于一些反应,孵化时间可延长至24小时,以增加其敏感性。

      9、用PBS清洗3次,每次不低于5min。

      10、辣根过氧化物酶标记的二抗(特异性对一抗)。这些试剂可以从不同的经销商那里购买。如果双抗的正确使用量不明,测试1:50-1:1000稀释的双抗。用含蛋白质的PBS稀释,如3%BSA/PBS。


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